试管动物所用技术[试管婴儿技术]

试管动物所用技术[试管婴儿技术]

1、给供体注射*****，使一头母畜的卵巢一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的母细胞，之后从输卵管中冲取母细胞，直接与获能的男性细胞在助孕受精。1.助孕的采集与培养方法

2、从屠宰场得到的废弃牛卵巢中采集助孕，在助孕培养成熟操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入**，同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸助孕。活体卵巢中采集助孕采集的方法：假**法、手握法、电**法获能处理：培养法：(人工配制的获能液中培养）用于啮齿动物、家兔和猪化学法：用于牛、羊等大型哺乳动物

3、男性细胞的采集和获能在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程

4、助孕受精二、胚胎的早期培养二、胚胎的早期培养

5、发育培养液成分：水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等.不同动物胚胎移植的时间不同牛、羊：桑椹胚或囊胚小鼠、家兔：卵裂期或囊胚试管婴儿：8个或16个细胞阶段

试管动物试管动物技术：通过使母细胞和男性细胞在下成熟和受精，并通过培养发育成后，再经产生后代的技术。助孕条件人工操作早期胚胎移植试管动物技术的三个基本操作环节：第1步：助孕受双方细胞母细胞的采集与培养男性细胞的采集与获能受精第二步：胚胎的早期培养第三步：胚胎移植

试管动物技术.

1、**的稀释

2、分装冷冻前的**稀释方法有一次稀释法和两次稀释法。

3、颗粒**将处理好的稀释**直接进行降温平衡，然后再滴冻成颗粒状。制作简便，利于推广，可充分利用贮藏罐。但有效男性细胞数不易标准化，原因是滴冻时颗粒大小不标准，不易标记，品种或个体之间混淆，**暴露在外，易污染;大多**需解冻液解冻。**的分装依据**的冷冻方法，目前有三种类型或剂型。

4、安部**将处理好的稀释**分装于安部中。制作复杂，冻结、解冻时易爆裂，破损率高;由于体积大，液氮罐利用率低，相对成本增高，但保存效果好，标记好，不易污染。

5、细管**多采用0.25d、0.5ml的塑料细管。它具有颗粒、安瓿法的优点，对于机械化生产极为方便，多采用自动细管冻精分装装置，装于细管中**不与外界环境接触，而且阳管上标记有品种、日期、活率等，易于贮存，冻后效果好。

6、**的冷冻将稀释的**缓慢降温至4～5℃，并在此环境中放置一定时间，以增强男性细胞的耐冻性，这个处理过程叫平衡。

7、颗粒**冷冻法将装有液氮的广口保温容器上置一铜纱网或铝饭盒盖，距液氮面1～2cm，预冷数分钟使网面温度保持在-80～-120℃。或用聚四氟乙烯凹版(氟板)代替铜纱网，先将其浸入液氮中几分钟后，置于距液氮面2cm处。然后将平衡后的**定量而均匀l滴冻，每粒0.1ml。停留2～4min后颗粒颜色变白时，将颗粒置于液氮中，取出1～2粒解冻，检查男性细胞活率，活率达0.3以上者则收集到小瓶或纱布袋中，并做好标记，贮存于液氮罐中存。

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